I frammenti anticorpali, nelle numerosi e innovative combinazioni, sono costantemente utilizzati per incrementarela specificità di azione e l’efficacia terapeutica per ottenere funzionalizzazioni sito-specifiche con reporter e altri payloads per generarere agenti diagnostici innovativi e nuovi bioterapeutici anticorpo - farmacoconiugati (ADC) [2, 3].
Nell'ultimo decennio abbiamo sviluppato numerosi anticorpi monoclonali contro differenti target proteici [4-12]inclusi nuovi biomarcatori tumorali e bersagli terapeutici per diverse patologie come Cripto-1, Nodal, la proteina E2 di HCV, Ape1 e PRAME.
Negli ultimi anni abbiamo allestito una piattaforma di espressione batterica per generare frammenti Fab ricombinantie scFv ingegnerizzati
ad hoc
con siti reattivi per la bioconiugazione sito-specifica [13] e la multimerizzazione utilizzando l'enzima transglutaminasi (MTGase) [14,15].
La piattaforma è stata validata impiegando l'anticorpo monoclonale anti-Her2 trastuzumab ottenendo varianti ricombinanti multimeriche dei frammenti Fab ed scFv dell’anticorpo [13].
Fab
2
bispecifici con affinità simili o superiori agli stessi anticorpi monoclonali sono stati ottenuti utilizzando frammenti Fab ricombinanti umanizzati anti-Cripto-1 e anti-Nodal.Tali frammenti sono stati marcati in maniera sito-specifica con diversi traccianti e anche usati per decorare nanoparticelle da 100 nm di albumina umana caricate con agenti citotossici, ottenendo così ADC di seconda generazione in formulazioni altamente innovativi. Sono inoltre in corso studibiochimici e biofisici di frammenti scFv contro bersagli terapeutici rilevanti per supportare la progettazione di sistemi CART.
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▼ Biomolecole in grado di modulare l’angiogenesi VEGF-dipendente Biomolecules able to modulate the VEGF-dependent angiogenesis |